LATE-PCR
LATE-PCR (Linear After The Exponential Polymerase Chain Reaction) es un tipo especial de PCR que ofrece algunas ventajas únicas para la identificación de agentes biológicos de alto riesgo como por ejemplo Bacillus anthracis, yersinia pestis y franciscella tularensis hasta cantidades de trazas extremamente pequeñas.
LATE PCR es una form novedosa de PCR asimétrica que proporciona ventajas técnicas significantes frente a PCR simétrica en tiempo real e igualmente permite el análisis de punto final de alta calidad.
La ilustración a continuación muestra como una reacción LATE-PCR proceda en comparación con una PCR simétrica convencional. LATE-PC típicamente usa dos iniciadores por segmento clave, un cebador de exceso y un cebador limitante. Las concentraciones son de forma que el cebador limitante es agotado durante las primeras fases de la amplificación exponencial, típicamente alrededor del ciclo umbral (Ct) de una reacción en tiempo real.
La característica clave de la eficacia de LATE-PCR es que el diseño de cebador tiene en cuenta la concentración del cebador diseñando los cebadores a temperaturas de fusión específicas (Tm). La concentración del cebador afecta directamente el Tm funcional del cebador y por eso tiene que ser integrado en el proceso de diseño del cebador. Como resultado, la reacción LATE-PCR que genera amplicones monocatenarios de manera eficiente después de un corto período de amplificación exponencial. Esto permite detectar números bajos de organismos objetivos (límites de un sólo dígito de detección han sido demostrados), realizar análisis de punto final, considerablemente aumentar el nivel de multiplexación en un ensayo y ofrece la capacidad de no sólo identificar sino diferenciar bacteria a nivel de cepa.
Smiths Detection tiene una licencia exclusiva para LATE-PCR de la Universidad de Brandeis para todos los mercados del mundo y ha conseguido licencias de Public Health Research Institute y Biosearch Technologies para la tecnología de sondas Molecular Beacons y tecnologías fluor/quencher.
LATE PCR es una form novedosa de PCR asimétrica que proporciona ventajas técnicas significantes frente a PCR simétrica en tiempo real e igualmente permite el análisis de punto final de alta calidad.
La ilustración a continuación muestra como una reacción LATE-PCR proceda en comparación con una PCR simétrica convencional. LATE-PC típicamente usa dos iniciadores por segmento clave, un cebador de exceso y un cebador limitante. Las concentraciones son de forma que el cebador limitante es agotado durante las primeras fases de la amplificación exponencial, típicamente alrededor del ciclo umbral (Ct) de una reacción en tiempo real.
La característica clave de la eficacia de LATE-PCR es que el diseño de cebador tiene en cuenta la concentración del cebador diseñando los cebadores a temperaturas de fusión específicas (Tm). La concentración del cebador afecta directamente el Tm funcional del cebador y por eso tiene que ser integrado en el proceso de diseño del cebador. Como resultado, la reacción LATE-PCR que genera amplicones monocatenarios de manera eficiente después de un corto período de amplificación exponencial. Esto permite detectar números bajos de organismos objetivos (límites de un sólo dígito de detección han sido demostrados), realizar análisis de punto final, considerablemente aumentar el nivel de multiplexación en un ensayo y ofrece la capacidad de no sólo identificar sino diferenciar bacteria a nivel de cepa.
Smiths Detection tiene una licencia exclusiva para LATE-PCR de la Universidad de Brandeis para todos los mercados del mundo y ha conseguido licencias de Public Health Research Institute y Biosearch Technologies para la tecnología de sondas Molecular Beacons y tecnologías fluor/quencher.
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